TPM3-ROS1 基因融合是一種在癌癥中，尤其是非小細胞肺癌（NSCLC）中發(fā)現的分 子異常，具有重要臨床意義。TPM3 基因位于 1 號染色體，編碼原肌球蛋白 3，參與肌肉收 縮和細胞骨架穩定；而 ROS1 基因位于 6 號染色體長(cháng)臂（6q22.1），編碼受體酪氨酸激酶， 屬于胰島素受體家族，調控細胞增殖和分化。當兩者發(fā)生基因融合時(shí)，通常因染色體易位 導致 TPM3 的啟動(dòng)子或結構部分與 ROS1 的激酶結構域結合，形成持續激活的融合蛋白。 這種異常激活會(huì )驅動(dòng)下游信號通路（如 RAS-RAF-MEK-ERK 和 PI3K-AKT-mTOR）的過(guò)度 活化，從而引發(fā)腫瘤發(fā)生。

      在 NSCLC 中，TPM3-ROS1 融合是 ROS1 基因融合的一種類(lèi)型，發(fā)生率約為 1%-2%， 常見(jiàn)于年輕、不吸煙的肺腺癌患者。盡管在多種腫瘤類(lèi)型中均有報道，但 NSCLC 是最主 要的關(guān)聯(lián)癌癥。ROS1 融合的其他常見(jiàn)伴侶基因包括 CD74、EZR、SDC4 等，其中 CD74 是最常見(jiàn)的融合伙伴。

      BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長(cháng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴(lài)的驅動(dòng)基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。
 

Figure 1. TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3 細胞的構建原理圖

1.WB of TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3

Figure 2. WB of TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3

 

2.Sanger of TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3


Figure 3. Sanger of TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of TPM3(E8)-ROS1(E35) BaF3(C3).